Berdasarkan mekanisme kerjanya,antibiotik dibagi dalam lima kelompok yaitu :
- Menghambat metabolisme sel mikroba.
Antimikroba yang termasuk kelompok ini adalah sufonamid dan trimetoprim.
- Menghambat sintesis dinding sel mikroba
Obat yang termasuk kelompok ini ialah penisilin, sefalosforin dan basitrasin.
- Mengganggu permeabilitas membran sel mikroba
Obat yang termasuk kelompok ini ialah polimiksin dan golongan polien.
- Menghambat sintesis protein mikroba
Obat yang termasuk kelompok ini ialah golongan makrolid, tetrasiklin dan kloramfenikol.
- Menghambat sintesis atau merusak asam nukleat sel mikroba
Obat yang termasuk kelompok ini ialah golongan aminoglikosid, makrolid, tetrasiklin dan kloramfenikol (Gunawan 2007).